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信帆生物告訴您結(jié)締組織類細胞培養(yǎng)
更新時間:2020-01-13   點擊次數(shù):868次

信帆生物告訴您結(jié)締組織類細胞培養(yǎng)

 

一、成纖維細胞培養(yǎng)

用人或動物胚體為好;動物可用小鼠或雞胚,去頭和內(nèi)臟,剪成小碎塊后,用胰蛋白酶消化法培養(yǎng);如為人胚,可取皮膚培養(yǎng)。幼兒包pi是培養(yǎng)成纖維細胞的很好對象。

二、巨噬細胞培養(yǎng)

1.實驗前三天,向每只小鼠腹腔內(nèi)注入無菌硫羥乙酸肉湯1ml(勿注入腸內(nèi))。

2.引頸殺死動物,手提鼠尾將全鼠浸入70%酒精中3~5秒。

3.置動物于解剖臺上,用針頭固定四肢,雙手持鑷撕開皮膚拉向兩側(cè),暴露出腹膜,但勿傷及腹膜壁。

4.再用70%酒精擦洗腹膜壁后,用注射器吸10ml Eagle液注入腹腔中,同時從兩側(cè)用手指揉壓腹膜壁,令液體在腹腔內(nèi)充分流動。

5.用針頭輕輕挑起腹壁,使動物體微傾向一側(cè),使腹腔中液體集于針頭下吸取入針管內(nèi)。

6.小心拔出針頭,把液體注入離心管中,250g 4℃離心10分鐘,去上清,加10 ml Eagle培養(yǎng)基。

7.計數(shù)細胞,每只小鼠可產(chǎn)生20~30×105細胞,其中90%為巨噬細胞。

8.為獲取3×105個帖附細胞/平方厘米,需接種2.5×106/ml。

9.為純化培養(yǎng)細胞,去除其它白細胞,在細胞培養(yǎng)接種數(shù)小時后,去除培養(yǎng)液,用Eagle液沖洗1~2次后,再加新Eagle培養(yǎng)液置37℃ CO2溫箱中培養(yǎng)。

 

 

信帆生物公司主要代理產(chǎn)品:
ELISA試劑盒:進口ELISA試劑盒,國產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒等。
培養(yǎng)基:微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。
血清:胎牛血清,人血清,動物血清,NQBB,Hyclone,Gbico原裝血清 。
生物試劑:Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進口試劑。

標準品對照品:進口對照品,進口對照藥材,進口標準品.
抗體:一抗,二抗,流式抗體等。
放免試劑盒:進口放免試劑盒,國產(chǎn)放免試劑盒,進口美國鳳凰等放免試劑盒。
實驗室代測服務:放免代測,WB實驗,免疫組化代測,熒光定量PCR代測,病理細胞染色代測,生化實驗代測等。

 

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