超氧陰離子檢測試劑盒計算公式和產品說明!
規格：50T/48S
產品內容：
提取液：液體100mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體32mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：液體25mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體25mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑四：lv仿，自備。
標準品：液體1mL×1 支，4℃保存。10μmol/mL 。
產品說明：
生物體內超氧陰離子等活性氧具有免疫和信號傳導的作用，但積累過多時會對細胞膜及生物大
分子產生破壞作用，導致機體細胞和組織代謝異常，從而引起多種疾病。
超氧陰離子與鹽酸羥胺反應生成NO2－，NO2－在對氨基苯磺酰胺和萘乙二胺鹽酸鹽的作用下，
生成紅色的偶氮化合物，在530nm 有特征吸收峰，根據A530 值可以計算樣品中O2－含量。
自備實驗用品及儀器：
天平、水浴鍋、離心機、可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿、lv仿和蒸餾水。
超氧陰離子檢測試劑盒計算公式和產品說明!
操作步驟：
一、超氧陰離子提取
1. 植物、動物組織：稱取約0.1g 樣本，加入提取液1mL，充分研磨，12000rpm，4℃，離心20min，
取20μL 上清測定蛋白含量，其余上清作為待測樣本。
2. 標準溶液的制備
取適量標準液，首先16 倍稀釋至0.625μmol/mL，然后進行倍比稀釋至0.3125、
0.15625、0.078、0.039、0.0195、0.009765、0.0049、0.00244、0.0012、0.0006umol/mL 梯度稀釋
的標準溶液，用0.3125、0.15625、0.078、0.039、0.0195、0.009765、0.00244、0.0006umol/mL
標準管做標準曲線。
3. 血清或培養液：直接測定。
超氧陰離子含量計算公式
1.標準曲線的繪制
以ΔA 標準為y 軸，標準溶液濃度為x 軸，繪制標準曲線y=kx+b。
2.超氧陰離子含量的計算
將ΔA 樣品帶入方程得到x 值（μmol/mL）
（1）按照樣本質量計算
超氧陰離子含量（μmol/g）= x×V 樣本÷（V 樣本÷V 提取×W）=x÷W。
超氧陰離子產生速率（μmol/ g·min）= x×V 樣本÷（V 樣本÷V 提取×W）÷T=0.05x÷W。
（2）按照蛋白質濃度計算
超氧陰離子含量（μmol
prot）= x×V 樣本÷（V 樣本×Cpr）=x÷Cpr。
超氧陰離子產生速率（μmol/ mg prot·min）= x×V 樣本÷（V 樣本×Cpr）÷T=0.05x÷Cpr。
(3) 血清或培養液
超氧陰離子含量（μmol/mL）= x
超氧陰離子產生速率（μmol/mL·min）= x÷T=0.05x。
V 樣本：參與反應樣本體積，0.2ml；V 提取：提取過程中加入的提取液體積，1mL；Cpr：樣
本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣品質量，g；T：反應時間，20min。
超氧陰離子(OFR)含量檢測試劑盒計算公式和產品說明!
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