麻豆xxxxhd videos-麻豆按摩-麻豆成人传媒一区二区-麻豆传煤一区免费入-久久秋霞理伦片-久久青娱乐

新聞中心您的位置:網站首頁 >新聞中心 >組織甘油三酯檢測試劑盒操作方法詳解!
組織甘油三酯檢測試劑盒操作方法詳解!
更新時間:2018-09-28   點擊次數:2544次

組織甘油三酯檢測試劑盒操作方法詳解!

 

描述:

甘油三酯是由甘油和脂肪酸酯化而成,是血脂的主要成分,也是機體重要的供能物質。高甘油三酯和高膽固醇血癥是常見的高脂血癥,與許多疾病相關。與血漿甘油三酯測定相比,實體組織和細胞的甘油三酯測定并非易事。本試劑盒避免了有毒的lv仿甲醇提取、繁雜的氮氣吹干和脂質復溶等步驟,采用能試劑進行組織細胞裂解和甘油三酯抽提,而且優化了GPO Trinder酶學反應組分和操作步驟。簡單易行、靈敏度高檢測范圍為 20-2000µmol/L。可用于測量動植物組織細胞、固態食品材料、高濃度油料樣品中的甘油三酯含量。

 

原理:

(1)脂肪酶分解血清中的甘油三酯為甘油;(2)甘油激酶將甘油化為3-甘油;(3)3-甘油被甘油氧化酶氧化產生過氧化氫;在過氧化物酶作用下生色底物轉化為苯醌亞胺,其光密度值與甘油濃度成正比。

適用范圍:適用于動物實體組織、培養細胞、油料植物組織、固態食品組織、高濃度油料樣品中甘油三酯含量的測定。

 

操作方法:

組織細胞裂解:
   在裂解前,組織或者細胞用PBS洗滌兩次以去除甘油
1. 原代脂肪細胞:200g,5分鐘離心收集細胞。建議每100 µl壓積(Packed Cell Volume)脂肪細胞加入1ml裂解液,震蕩裂解,而后室溫靜置10分鐘。
2. 分化脂肪細胞或非脂肪細胞:可先用胰酶消化、離心收集細胞而后進行裂解,也可直接在培養皿內進行裂解。通常情況下,可按比例每1x106 個細胞加入0.1ml裂解液,混勻后室溫靜置10分鐘。
3. 動物組織:離心管稱重,加入組織塊后再稱重,二者相減(即減量稱重法)計算組織重量(約50mg)。強烈建議按比例每1mg組織加20µl裂解液以減少樣品間蛋白和脂質含量變異而產生的誤差。強烈建議裂解液用量在1ml左右,保證有效的勻漿裂解與脂質提取。用電動高速勻漿器或手動玻璃勻漿器破碎組織。(不推薦超聲方法,因其不能*和均勻破碎。應根據預實驗調整初始的組織細胞加入量),勻漿后靜置10分鐘。
4. 植物油料種子、食品、含高油量樣品:用減量稱重法對樣品進行稱重,建議按比例每1mg組織加20µl裂解液以減少樣品間蛋白和脂質含量變異而產生的誤差。加入裂解液后可用研缽對樣品進行研磨,而后將研磨液轉移到新的離心管中,室溫靜置10分鐘。

 

組織甘油三酯檢測試劑盒操作方法詳解!

二. 裂解液處理:
1. 取適量上清液轉移到1.5ml離心管中,進行步驟2的操作。余下的裂解液可用BCA法蛋白定量試劑盒(#P1511)進行蛋白定量或-20ºC儲存。
2. 70ºC 加熱10分鐘,組織量多時可能出現絮狀沉淀。
3. 室溫2000rpm離心5分鐘,上層清液即可用于酶學測定。

二 工作溶液配制:按4:1比例,取4ml試劑R1與1ml試劑R2混合即可,立即使用或4ºC保存<1天,變色棄去。

三 標準品稀釋:用蒸餾水、生理鹽水或與樣品緩沖液一致的液體,將4mM甘油標準品倍比稀釋為1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125 µmol/L,通常取其中4~6管即可,注意設置0濃度對照反應管。

 

注意事項:

1.  維生素C>0.18g/L、血紅蛋白>2g/L、膽紅素>0.25g/L、強還原劑二硫蘇糖醇、巰基乙醇等會干擾測。高濃度EDTA會干擾測定。

2.  樣本即使保存在-20ºC的環境下,甘油三酯也會自發水解。因此建議樣品4ºC保存時間應短于24小時,當-70ºC保存時,也應不超過1個月。

3.  如果室溫較低,應延長反應時間或在37ºC進行反應。

4.  不同類型組織和細胞內甘油三酯含量差別很大,應根據預實驗調整初始的裂解液的加入量。對于脂肪組織而言,一般來說裂解液用量在20-30mg/ml即可。

 

組織甘油三酯檢測試劑盒操作方法詳解!

網站首頁 關于我們 新聞中心 產品中心 聯系我們
備案號:蘇ICP備16008122號-3   GoogleSitemap   技術支持:環保在線 管理登陸
© 2018 南京信帆生物技術有限公司(m.yqftif.cn) 版權所有 總訪問量:666164
主站蜘蛛池模板: 亚洲91在线视频 | 亚洲午夜久久久久久91 | 4虎最新网站 | 欧美视频精品在线观看 | 亚洲综合涩| 你懂的网址在线观看 | 四虎影视在线观看2022a | 日韩在线视频网站 | 成年免费大片黄在看 | 成人一a毛片免费视频 | 免费黄色福利视频 | 亚洲一级片免费 | 亚洲人成亚洲人成在线观看 | 四虎影视在线看免费 720p | 黄色免费片| 亚洲国产激情一区二区三区 | 日韩观看 | 伊人久久大香线焦在观看 | 伊人久久大香线蕉综合爱婷婷 | 欧美一级欧美三级 | 99久久做夜夜爱天天做精品 | 4虎最新网站 | 亚洲第一免费视频 | 自啪| 12306午夜福利在线观看 | 5月丁香6月婷婷 | 免费无遮挡无遮羞在线看 | 久久精品老司机 | 亚洲爱视频| 视频成人永久免费视频 | 亚洲精品免费在线视频 | 国产91剧情 | 久久91精品久久久久久水蜜桃 | 欧美在线视频免费观看 | www狠狠| 亚洲夂夂婷婷色拍ww47 | 大学生a级毛片免费观看 | 亚洲国产成人精品青青草原100 | 亚洲十欧美十日韩十国产 | 精品视频在线观看免费 | 中文一区在线 |