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谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)試劑盒不同樣本的檢測(cè)方法
更新時(shí)間:2020-03-06   點(diǎn)擊次數(shù):634次

谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)試劑盒不同樣本的檢測(cè)方法

 

產(chǎn)品說(shuō)明:
GOT( 2.6.1.1)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,催化可逆轉(zhuǎn)氨基反應(yīng),是氨基
酸代謝的重要酶。此外,GOT 在心肌細(xì)胞中含量zui高,上一般常作為心肌梗塞和心肌炎的輔助檢查。肝臟損害時(shí)其血清濃度也可升高。

 

GOT 催化 α-酮戊二酸和天門(mén)東氨酸發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng),生成谷氨酸和草酰乙酸,草酰乙酸進(jìn)一
步自行脫羧生成丙酮酸;丙酮酸可與 2,4-二硝基苯肼反應(yīng)生成 2,4-二硝基苯腙,在堿性條件下顯棕紅色;測(cè)定 505nm 吸光度的變化,即可計(jì)算 GOT 酶活力。

 

試驗(yàn)需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。

 

操作步驟:

一、樣品測(cè)定的準(zhǔn)備

1、 細(xì)胞或細(xì)菌樣品的制備 :

先收集細(xì)胞或細(xì)菌樣品到離心管內(nèi),棄上清,按照每 500 萬(wàn)細(xì)胞或細(xì)菌加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率 20%,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次)。3500g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
 

2、組織:
稱(chēng)取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液進(jìn)冰浴行勻漿。3500g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

 

3、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。

 

谷草轉(zhuǎn)氨酶要分布在心肌,其次是肝臟、骨骼肌和腎臟等組織中。正常時(shí)血清中的AST含量較低,但相應(yīng)細(xì)胞受損時(shí),細(xì)胞膜通透性增加,胞漿內(nèi)的AST釋放入血,故其血清濃度可升高,一般常作為心肌梗死和心肌炎的輔助檢查。谷草轉(zhuǎn)氨酶的正常值為0~40單位/升,當(dāng)谷草轉(zhuǎn)氨酶明顯升高,谷草轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)大于1時(shí),提示有肝實(shí)質(zhì)的廣泛損害,預(yù)后不良。

 

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