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組織總磷含量檢測試劑盒案例操作
更新時間:2021-10-12   點擊次數:511次

組織總磷含量檢測試劑盒案例操作


產品說明: 磷的存在形態包括無機磷與有機磷。無機磷主要指根,參與生物體內多種代謝,包括能量代謝、核酸代 謝、蛋白質化和脫化等。通過測定總磷與無機磷含量即可了解作物對磷的利用率,進而為合理施肥提供 依據。總磷經消化后,轉化成無機磷。鉬藍法是測定無機磷含量的經典方法,一定條件下,鉬藍與根生成660nm 有特征吸收峰的物質,通過測定660nm光吸收,即可計算無機磷含量,進而可計算出組織中總磷含量。


技術指標:
咀低檢出限:0.0585 mmol/L
線性范圍:0.0625-2 mmol/L
注意:實驗之前建議選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者 增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品: 可見分光光度計、離心機、水浴鍋、可調式移液槍、1mL 玻璃比色皿、蒸餾水和濃硫酸。 


操作步驟: 

一、有機磷消化(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻) 稱取約 0.1 g 組織于帶蓋試管中,加濃硫酸 1.0 mL,蓋緊(封口膜封口,防止水分散失)后沸水浴 10min 左 右,待溶液呈黑色或棕色時取出。稍冷后,加試劑一 200μL,充分混勻,蓋緊后繼續沸水浴,直到溶液呈透明狀, 取出室溫冷卻后,加蒸餾水 3.8 mL,充分混勻;室溫,10000rpm,離心 10min,取上清液,待測。


注意事項: 

1、試劑三需臨用前配制,限當天使用。 

2、測定前先用 1~2 個樣本做預實驗,如吸光值大于 0.8 時,需用蒸餾水做相應稀釋。


實驗實例: 1、 取 0.1g 腎臟按照提取步驟操作,離心取上清之后按照測定步驟操作,測得計算 A 測定=0.273,A 空白=0.016, A 標準=0.429,按樣本質量計算總磷含量得: 總磷含量(mmol/g 質量)= 0.005×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)÷W= 0.031 mmol/g 質量。 2、 取 0.1g 脾按照提取步驟操作,離心取上清之后按照測定步驟操作,測得計算 A 測定=0.268,A 空白=0.016,A 標準=0.429,按樣本質量計算總磷含量得: 總磷含量(mmol/g 質量)= 0.005×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)÷W= 0.031 mmol/g 質量。

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